草履蟲（Paramecium）養殖放大方法

一、草履蟲(paramecium)介紹:

身體很小，圓筒形的原生動物，它只有一個細胞構成，是單細胞動物。最常見的是尾草履蟲。體長只有80～300微米。因為它身體形狀從平面角度看上去像一隻倒放的草鞋底而叫做草履蟲。

草履蟲全身由一個細胞組成，身體表面包著一層膜，膜上密密地長著許多纖毛，靠纖毛的划動在水中旋轉運動。它身體的一側有一條凹入的小溝，叫「口溝」，相當於草履蟲的「嘴巴」。口溝內的密長的纖毛擺動時，能把水裡的細菌和有機碎屑作為食物擺進口溝，再進入草履蟲體內，供其慢慢消化吸收。殘渣由一個叫肛門點的小孔排出。草履蟲靠身體的表膜吸收水裡的氧氣，排出二氧化碳。

二、草履蟲（Paramecium）養殖放大方法

草履蟲（Paramecium）是斑馬魚早期仔魚的重要活餌，尤其適合剛開口、尚不適合攝食豐年蝦無節幼體（Artemia nauplii）的仔魚。如果目標是供應斑馬魚實驗室，草履蟲養殖放大的核心不只是增加培養液體積，而是要建立一套可持續、高密度、穩定收穫，且能降低細菌污染與培養崩潰風險的生產流程。對於 GENDANIO 這類斑馬魚養殖系統及研究支援應用，可以將草履蟲培養設計成獨立的活餌生產模組，從小型種源培養逐步擴展到數十公升，甚至百公升級的生產系統。

草履蟲放大的三種主要方法

草履蟲的培養通常是利用細菌作為食物來源，因此培養方式與一般藻類培養不同。常見方法如下：

對於斑馬魚仔魚活餌生產，建議先採用小麥粒／酵母培養建立種源，再逐步轉為批次或半連續式生產。

斑馬魚研究機構常見的草履蟲培養方法之一，在斑馬魚研究飼養流程中，約 1~2 L 的培養容器可在接種後約 4 天進入可使用階段。這可作為初期試驗的參考，但實際收穫時間仍應以草履蟲密度為準。

此次方法我們以酵母培養建立種源:  將酵母菌研磨為細粉，為草履蟲、輪蟲的攝食性食物來源。也可以用牛奶(粉)取代。

準備物品

1. 酵母粉
2. 研缽、漏斗
3. 小瓶子

步驟:

1. 酵母粉開一包約12g打開倒進研缽
2. 研磨成細粉，使之易溶於水
3. 倒進小瓶子當STOCK，保存於乾燥箱。

簡易教學影片:  https://youtu.be/Yp1riqLB2RM

Stage 1：種源培養（Seed Culture）

目的：建立穩定、健康且可持續擴增的草履蟲母種。其種源可直接從本公司購買

建議配置：

重要：母種與大量生產槽要分開。 生產槽發生污染或崩潰時，才不會連帶失去全部種源。

Stage 2：中間擴培（Intermediate Culture）

將穩定的母種接種到 2–5 L 培養容器。
這個階段的重點是測試培養液與草履蟲的比例，並確認培養液是否能支持草履蟲持續增殖。

建議做法：

1. 準備新鮮培養液。
2. 先讓培養液中的食物菌源建立。
3. 接種健康、活動力良好的草履蟲。
4. 每天固定時間觀察並記錄密度。
5. 當草履蟲密度達到預定收穫標準時，取部分作為下一階段種源。

這裡不建議一開始就追求最高密度。應先找出能夠重複成功的培養條件，再擴大體積。

Stage 3：大量生產（Mass Culture）

當 2–5 L 培養條件穩定後，可嘗試 10–20 L，再依據實際密度與收穫量擴展至 50–100 L。

放大時並不是把 2 L 的配方乘以 50 倍，就直接製作 100 L 培養槽。 大體積培養會改變氧氣交換、有機物累積、細菌生長與底部沉積等條件。

四、如何判斷草履蟲是否達到收集標準？

建議不要單純用培養天數判斷，而是建立密度與品質標準。

1. 草履蟲密度（cells/mL）
2. 每公升每日可收穫量（cells/L/day）
3. 每批培養的穩定生產天數

這三個數據會直接決定未來需要多少培養槽，以及能否滿足仔魚每日的活餌需求。

以上需要實際操作的經驗判斷。培養液混濁不代表草履蟲密度一定高；混濁也可能來自細菌大量增殖。
因此，可以在顯微鏡下鏡檢建立可靠生產流程。

五、草履蟲如何收集與濃縮？

培養槽 → 草履蟲分離／濃縮 → 仔魚餵食

當培養液中的草履蟲密度達到預定標準，就可以開始收集。
ZIRC 的流程使用兩段式篩網：先以約 55 µm 篩網去除較大顆粒，再以 10 µm 篩網收集草履蟲。實際使用時，仍需確認篩網適合你的草履蟲種類與個體大小。

建議操作：

1. 取出適量培養液。
2. 先去除小麥粒與較大的有機殘渣。
3. 濃縮草履蟲。
4. 使用乾淨、適合斑馬魚的水體沖洗或重懸浮。
5. 確認草履蟲仍有正常活動力後，再餵食仔魚。

初期不建議一次收穫整槽。可以先嘗試收穫約 10–20%，並觀察剩餘族群是否能恢復密度，再決定後續的收穫比例。
實際篩網孔徑需要依草履蟲種類、個體大小及目標仔魚口徑測試，避免收穫過程造成大量損失。
不建議直接把大量原始培養液倒入仔魚缸。 除了草履蟲，培養液中的細菌、酵母、有機物與代謝產物也可能一併進入仔魚系統，會直接讓幼仔魚死亡。

六、草履蟲(paramecium)放大簡易方法

假設從本公司購得種源 600 mL 的草履蟲，也已經達到良好密度，要放大至2公升容器做法：

1. 靜置沈澱十分鐘後取上部約 400–500 mL 活躍的草履蟲培養液，加入新的2公升培養容器。剩下培養液100~200ml不使用。
2. 另取1200~1500mL無菌水，加入研磨過的酵母細粉少許約0.1mg，搖晃快速溶於水，做為培養液。
3. 將已準備好的培養液，加入新的2公升酵母菌培養容器。鎖蓋，留些許空氣為微氧環境，蓋子不鎖緊，微緊即可。
4. 放置於陰暗涼處，約20-25度C，避免照射日光，視生長情形約，觀察接種後 2–4 天的族群變化。
5. 確認新培養槽穩定增殖後，再進行下一輪擴培。

若培養液中的草履蟲密度偏低，應先讓原培養槽繼續增殖，不要急著分槽。ZIRC 的流程也要求新培養槽具有足夠的草履蟲接種密度。

簡易教學影片:  https://youtu.be/mVA6oiapG_s

本頁提供資料僅供網路查詢及參考，恕無法詳細提供protocol。

良好草履蟲(paramecium)、輪蟲(rotifer)養殖狀態影片:

顯微鏡版: https://youtu.be/FMqNs2Z5Mlo

一般觀察版: https://youtu.be/Vw4OF6Gd_bc

七、常見問題與處理方式

本公司產品、系統客戶、長期合作夥伴，可提供更詳細的生物技術操作protocol及實際教學服務，如需服務請直洽本公司服務人員。